B2358 - TECNOLOGIE DEL DNA RICOMBINANTE

Anno Accademico 2024/2025

  • Docente: Andrea Vannini
  • Crediti formativi: 6
  • SSD: BIO/11
  • Lingua di insegnamento: Italiano
  • Modalità didattica: Convenzionale - Lezioni in presenza
  • Campus: Bologna
  • Corso: Laurea in Scienze biologiche (cod. 8012)

    Valido anche per Laurea in Biotecnologie (cod. 8005)

Conoscenze e abilità da conseguire

Al termine del corso lo studente possiede solide basi teoriche per la comprensione delle principali tecnologie e metodologie utilizzate in ambito di ricerca biomolecolare. Inoltre, lo studente sviluppa capacità critica per la selezione delle tecniche e delle metodiche molecolari più adatte alla conduzione di specifiche indagini scientifiche, capacità di interpretazione dei dati ottenuti e di valutare l’utilizzo di ulteriori tecniche e/o metodologie alternative o complementari.

Contenuti

Nel corso saranno trattate le tecniche, i metodi e gli approcci sperimentali derivati dalla biologia molecolare e ampiamente utilizzate in diversi ambiti biologici.

Le principali tecniche trattate includono:

  • Purificazione degli acidi nucleici e valutazione della loro concentrazione, integrità e purezza
  • Isolamento di DNA e RNA tramite ultracentrifugazione
  • Uso di sonde di DNA per l'identificazione e l'analisi di specifiche sequenze genomiche
  • Tecnologie per l'isolamento e la manipolazione di geni e segmenti di DNA (digestione enzimatica, ligazione, trasformazione)
  • Vettori di clonaggio, vettori di espressione procariotici ed eucariotici, cosmidi
  • Espressione di geni eterologhi in cellule eucariote (trasfezione, trasduzione)
  • Reazione a catena della polimerasi (PCR)
  • Determinazione della sequenza nucleotidica del DNA utilizzando metodi chimici, sequenziamento Sanger e tecnologie di sequenziamento di nuova generazione (NGS) come Illumina, Nanopore e SMRT
  • Tecniche di editing genomico mirato (TALEN e CRISPR-Cas9)
  • Analisi dell'espressione genica: Northern Blot, qRT-PCR (con intercalante, Taqman, digital), microarray e RNA-sequencing
  • Tecniche per inibire l'espressione di geni specifici: RNA antisenso, interferenza dell'RNA e studio degli RNA non codificanti batterici
  • Analisi delle interazioni tra molecole biologiche: footprinting, EMSA, filter binding, immunoprecipitazione della cromatina, 3C e derivati, microscopia a forza atomica
  • Esame della struttura secondaria e terziaria dell'RNA

Testi/Bibliografia

Il materiale per lo studio sarà fornito durante il corso

Metodi didattici

Lezioni frontali

Modalità di verifica e valutazione dell'apprendimento

La verifica dell'apprendimento avviene attraverso l'esame finale, che accerta l'acquisizione delle conoscenze e delle abilità attese tramite lo svolgimento di una discussione sugli argomenti svolti durante il corso. La valutazione è in trentesimi.

Strumenti a supporto della didattica

PC, videoproiettore e lavagna.

Orario di ricevimento

Consulta il sito web di Andrea Vannini